本文是一篇临床医学论文，本研究发现膳食纤维对益生菌产生了积极影响，但其作用机制尚未明确，以及未能明确膳食纤维与益生菌之间的配伍；且目前的研究无法明确膳食纤维与益生菌定植于肠道并发挥作用的有效剂量。
第一章 文献综述
1.1溃疡性结肠炎
溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis，UC）概念由塞缪尔·威尔克斯首次提出，是一种非特异性炎症性肠病（Inflammatory bowel disease，IBD），本病在世界范围内较克罗恩病（Crohn's disease，CD）多见[1]。UC伴有反复发作的炎症和溃疡形成，以不同程度的由直肠向近端结肠延伸的连续方式引起浅表黏膜炎症，主要表现为免疫功能反应异常，细胞因子失衡和结肠黏膜炎症[2]。
UC以前多流行于西方国家；但近年来UC以工业化国家最多，亚洲发病率也呈上升趋势，中国，印度，韩国等国也有发生[3-4]。所以，探讨一种安全有效的UC干预方法已成为近年来国内学者关注的一个新焦点。
1.1.1 UC的发病机制
UC病因至今尚存在争论，尚有不少学者对其进行了研究。通过总结当前研究发现，UC的产生与发展涉及到诸多因素，包括遗传，饮食因素，自身免疫及肠道菌群失调等[5-6]。
（1） 遗传因素
研究调查显示，UC存在家族聚集现象，虽然IBD家族史患者罹患UC的几率仅8%~14%，但是UC患者一级亲属确诊UC的危险比正常人高8倍，单卵双胞胎共患病几率为16%，双卵双胞胎共患病几率4%[7]。研究报告显示，非裔美国人与西班牙裔人群IBD患病率显着低于白人，但近期研究显示，白人与非白人人群发病率差距小于原先所认为的水平，且表型类似[8]。犹太人比非犹太人更有可能患上UC，这比非犹太人高出三倍。犹太人中阿什肯纳兹犹太人患病率比西班牙系犹太人，美国犹太人及欧洲犹太人患病率高[9]。这说明UC在种族和地理上都存在着一定差异性。
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1.2益生菌
益生菌被定义为在给与足够量时可给宿主健康带来益处的微生物，国际益生菌和益生元科学协会的一个专家小组于2013年重新研究了益生菌[83]。益生菌已经成为了IBD的一种新的潜在治疗策略，特别是对于希望使用“自然和安全”方法的患者[84]。在不同的UC动物模型中获得了积极的结果之后进行临床治疗研究，发现某些益生菌对UC患者有积极的作用[85-88]。例如，乳酸菌是一种更受欢迎的益生菌，被认为可以分泌细菌素，阻止有害细菌的粘附或易位[89]；益生菌与肠上皮细胞之间的一种新的通信机制，动物双歧杆菌通过调节促凋亡细胞因子的表达来提高肠细胞的存活率，从而缓解DSS诱导的结肠炎[90]；长期服用枯草芽孢杆菌可以缓解炎症性肠病，其主要通是过保护肠道完整性、调节上皮细胞增殖、重塑微生物结构和功能发挥作用[91]。
1.2.1益生菌在UC中的研究现状
目前，关于UC新的治疗方法方面已经取得了迅速的进展。肠道菌群对UC患者炎症反应的相互作用表明，益生菌可以作为治疗和预防UC的一种新方法[83]。益生菌如大肠埃希菌Nissle 1917和VSL#3，已被研究用于诱导和维持UC的缓解，对预防和治疗轻度至中度UC具有一定效果[92]。益生菌在UC中的作用机制已得到了广泛的研究：调节免疫反应、抑制炎症[93]，加强肠道屏障[94]，抑制氧化应激反应[95]和维持肠道微生物动态平衡[96]。益生菌作为UC的治疗药物的各种临床研究描述如表1-3。
临床医学论文参考
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第二章益生菌培养条件优化
2.1引言
枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）是一种常见于土壤和胃肠道的革兰氏阳性细菌，可防止过敏性肺炎，对预防胃肠炎、败血症和过敏性肺部疾病很有效。 [11-12]。 双歧杆菌（Bifidobacterium）被认为是人类和其他温血动物中最重要的肠道微生物群[136]。动物双歧杆菌是肠道中最具代表性的有益细菌，具有多种生理功能，包括促进肠道健康[141]、增强免疫力[145]、抑制有害细菌的生长[143]、预防肠道疾病[142]，并可作为酶或原料用于食品加工。然而，由于生物合成的缺陷和苛刻的培养条件，枯草芽孢杆菌和动物双歧杆菌培养物的低密度限制了商业生产的扩大。
本研究以动物双歧杆菌、枯草芽孢杆菌为研究对象，以OD值和活菌数为考察指标，通过单因素、正交试验和响应面法对培养条件进行优化。
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2.2材料与方法
2.2.1试验菌株
枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis），菌种编号L1，由西北民族生命科学与工程学院资源微生物实验室冻藏保存，动物双歧杆菌（Bifidobacterium animalis），菌种编号: CICC6165，购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。
2.2.2仪器和设备
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第三章 复合制剂对DSS诱导小鼠急性UC的影响 ........................... 39
3.1 引言 ............................... 39
3.2 材料与方法 ............................ 39
第四章 全文结论 .................................. 55
4.1 全文结论 .................................... 55
4.2 创新点 ............................................... 55
第三章 复合制剂对DSS诱导小鼠急性UC的影响
3.1引言
溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis, UC）是一种非特异性炎症性肠病[1]。最近，人们对使用共生菌或发酵食品中存在的益生菌来调节微生物群，来调节微生物群并对UC患者的免疫系统产生积极影响。先前一项临床试验显示了长双歧杆菌536补充剂对日本UC患者能起到缓解的作用[124]。双歧杆菌对DSS诱导的小鼠肠道炎症的恶化有所缓解，说明双歧杆菌抑制了致病菌的生长，可以改善肠道炎症[125]。此外，枯草芽孢杆菌也能缓解UC患者的症状[140]。事实上，大量摄入纤维和水果可以降低73-80 %的乳糜泻风险，而大量摄入蔬菜则可以降低UC的风险[161]。然而有研究表明，每天至少摄入24.3 g膳食纤维（特别是水果来源的膳食纤维）可以降低40 %的IBD风险，但对UC没有影响[163]。大量数据表明，益生菌和益生元之间的协同作用有利于益生菌在胃肠道的存活和植入，通过调节炎症反应和肠道菌群组成对人体健康有益[165-166]。
本研究采用 30 %葡聚糖硫酸钠（DSS）灌胃诱导一般环境的UC小鼠模型。然后，对比分析益生菌-膳食纤维复合制剂和益生菌对小鼠模型的影响，同时以临床上的抗炎药物美莎拉嗪作为阳性对照，探讨益生菌和膳食纤维配合使用对急性UC小鼠的治疗效果及其可能作用机制。
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第四章 全文结论
4.1 全文结论
1．枯草芽孢杆菌培养条件为基础培养基中添加葡萄 糖13 g/L，大豆蛋白胨12 g/L，碳酸钙5 g/L，pH 7.0，温度37 ℃、接种量5 %、初始pH值7.0、转速为190 r/min、培养时间20 h，在此条件下活菌数为 5.34×108 CFU/mL，是LB培养基的9.9倍。
2．动物双歧杆菌为基础培养基中添加氮源（蛋白胨∶牛肉膏∶酵母粉=2∶2∶1）29 g/L，葡萄糖22 g/L，乙酸钠5 g/L，柠檬酸三铵2 g/L，磷酸氢二钾2 g/L，pH 7.75，按温度33 ℃、接种量5 %、初始pH值7.75、培养时间40 h，在此条件下活菌数 4.58×108 CFU/mL，是MRS培养基的3.0倍。
3．益生菌-膳食纤维复合制剂对急性UC小鼠的作用：本研究通过DSS诱导的急性UC小鼠模型，其表现为粘蛋白缺失、上皮变性和坏死，导致上皮细胞消失，固有层和黏膜下层被中性粒细胞浸润，隐窝消失，并伴有体重减轻，便血以及结肠缩短。 FH减轻了DSS所致UC小鼠体重下降和结肠长度缩短程度，降低DAI评分。组织学分析发现，通过FH干预可保留结肠组织、粘液屏障，并减少炎症细胞浸润。FH通过调节MDA和GSH水平以及SOD和MPO活性来防止结肠的氧化应激。此外，FH降低了小鼠血清中TNF-α、INF-γ和IL-6水平，增加IL-10和IL-4水平；以及增加了小鼠结肠中ZO-1、Occludin和Claudin-5的表达。以上结果表明，FH通过抑制肠道炎症、调节氧化应激以及改善肠道屏障的完整性，来缓解小鼠急性UC症状。这揭示了长期使用FH对急性UC有一定治疗效果，且与美沙拉嗪相比较，副作用更小。
参考文献（略）