利用分子生物技术研究益生菌对断奶仔猪生长及粪便菌群的影响

论文价格:免费 论文用途:其他 编辑:lgg 点击次数:180
论文字数:35200 论文编号:sb2014091111155210408 日期:2014-09-11 来源:硕博论文网

第1章前言


1.1生猪养殖概况
近30年来,我国畜禽养殖业发展迅猛。1980年我国畜牧业总产值在农林牧渔总产值中所占的比例为18%,而到了 2003年这一比例增长至34%,预计2015年达到36%(苏杨2006)。我国有7?8千年之久的养猪历史,一直以来,猪被认定为"六畜之首",猪养殖是我国的传统产业,是畜牧业的重中之重。自20世纪80年代商品经济时代的到来,我国养猪业走出家庭副业,向规模化和工厂化发展,养猪业水平有了极大的提高。1980年我国生猪年末存栏量分别为3.05亿头,到2013年底这一数个增加到4.75亿头。猪肉是日常食用肉最多的品种之一,其营养丰富,是不可或缺的动物性营养食品之一,也是我国最受欢迎的肉制品。我国是世界上最大的猪肉生产国与消费国,猪肉消费量整体呈递增趋势(Fig. 1-1)。随着人类生活水平的提高,人们对食品安全越来越重视,对猪肉的质量也提出了更高的要求。不仅要求质优价廉,而且要求安全无药物残留。许多学者在生猪养殖的规模化,规范化及健康安全方面做了大量深入的研究和探讨。
…………..


1.2仔猪生理特征
仔猪又叫保育猪或断奶猪,它是现代猪养殖业的核心之一。仔猪生长发育快,容易患病,其健康状况,对后期的生长发育将会产生极其重要的影响,直接关系到生产效益。这一阶段的成长与健康,研究人员投入了大量的精力。实践中,大多猪场对仔猪实行早期断奶,提高产房和母猪的生产效率,以提高经济效益。通常的做法是,仔猪出生后14~21 d、体重达到4 kg以上时断奶。这是因为仔猪在出生后14d时,通过母乳获得的抗体水平最低,而此时仔猪自身的免疫系统尚不成熟,抗病能力弱,极易感染母体内的各种病原微生物,从而患病。所以21 d后断奶的仔猪,大部分呼吸道已被母体微生物感染。断奶可以阻止母猪和仔猪之间疾病的传播,降低仔猪发病率,提高成活率和生长性能。这一时期的仔猪,其消化道,免疫系统及健康状态呈现这一时期独有的特征。仔猪的消化道仍处于发育之中,尚不完善。研究发现,仔猪的消化道发育最迅速的阶段在20~70日龄之间,其消化道内的生理结构、pH值和消化酶活性等都会随仔猪所处的环境变化而发生改变(范志勇and王康宁2000)。小肠是动物是吸收营养物质的主要器官,断奶后小肠绒毛菱缩,从而引起小肠吸收面积降低,严重影响营养物质的吸收,并导致仔猪生产性能下降,给生产带来损失。与断奶前相比,断奶后仔猪的小肠线毛高度在24 h内可降低25%, 5 d后可降低到50%。
……….


第2章BaciUus subtilis KN-42对断奶仔猪生长性能


2.1概述
目前,在我国Bacilli subtilis被认定为益生菌,并被允许作饲料添加剂使用。之前,我们认为枯草芽孢杆菌是好氧微生物,现在,有报道认刀它是一种兼性厌氧微生物,有游离氧存在时,可以快速消耗氧,氧耗尽后,也可以生长繁殖(NakanoandZuber 1998)。枯草芽孢杆菌可以产生芽孢休眠体,所以耐高温,且长期忙存菌体不易失活,而受到关注和欢迎(Nakano and Zuber 1998; Hong et al 2005)。枯草芽孢杆菌是一种重要的肠道微生物,它可以维持肠道正常的厌氧环境,达著到预防和治疗肠道病原微生物感染的效果。己有许多研究表明,日粮中添加subtilis达可以作用于肠道微生物菌群,以此促进动物的生长(Aliakbarpour et al 2012; Kim etal 2012; Sen et al 2012; Zhang et al 2012b; Tsukahara et al 2013)。此外,有研究指出,断奶仔猪摄入B. subtilis LS 1-2,对动物肠道生理,菌群体及机体免疫等均具有良好 、的效果,并促进仔猪的生长(Lee et312014)。然而,也有报道认为,动物食用益生菌后,对生长指标没有显著影响(Leeet312010)。因为,益生菌能否在动物体内起作用,.不仅取决于菌株自身,而且还取决于摄入剂量、饲料营养组成以及饲养中的管理水平(Vondruskova et al 2010)。本章的主要目的是研究不同剂量的B. subtilis KN-42对断奶仔猪生长性能,腹浑率及粪便菌群的影响,并重点研究了 Lactobacillus和E. coli的相对数量。釆用DGGE和多样性指数分析粪便总细菌的组成及多样性,此外,釆用real-time PCR检测类便中 Lactobacillus 和 E. coli 的拷贝数。
……….


2.2结果与分析
生长性能如Table 2-7所示。在phase I,各组之间在ADG和ADFI无显著差异(P>0.05),而在G/F上具有显著差异(P<0.05)。具体为:与NC相比,益生菌组(L、M和H)和抗生素组PC对飼料利用率显著提髙,体现在拥有较髙的G/F值,益生菌组之间无显著差异,而益生菌组H与PC组相比,显著提高(P<0.05)。其中,高剂量组H各生长性能指标最佳。在phase II,各组之间在ADG和G/F上有显著差异(i<0.05),而ADFI与phaseI相似,无显著差异。在ADG和G/F,组M、H和PC显著比阴性对照组高。其中,抗生素组PC各生长指标最好,其次是中剂量组M。综合2个阶段的结果(dl to 28),与阴性对照组相比,抗生素组PC,益生菌组M和H在ADG和G/F上显著提高(P<0.05),且三组之间差别不大,低剂量组无明显效果。这些结果表明,适量的枯草芽孢杆菌可以促进断奶仔猪的生长,其日增重和肉料比有显著提高。


……….


第3章Enterococcusfaecalis LAB31对断奶仔猪也长性能.........42
3.1 材料与方法 ........42
3.2 结果与分析........ 44
3.3 讨论 ........50
第4章Clostridium butyricum B1对断奶仔猪生长性能........3
4.1 材料与方法........ 53
4.2 结果与分析........ 55
4.3 讨论........64
第5章Bacillus coagulans F5对断奶仔猪生长性........ 67
5.1 材料与方法 ........67
5.2.1 生长性能和腹湾率........ 69
5.2.2 DGGE细菌群落分析........ 70
5.2.3 Lactobacillus DGGE 分析........ 72
5.2.4 定量PCR分析 ........74
5.3 讨论 ........74


第6章复合益生菌对断奶仔猪生长性能


仔猪的消化系统不够完善,免疫力低下,肠道内环境菌群结构不合理。仔猪断奶后其心理、环境和营养均发生改变,加剧断奶应激,常导致腹渴的发生,严重时甚至死亡,给养殖户带来巨大的经济损失。 .与单一益生菌制剂相比,复合制剂在防治腹湾及促进生长上更为卓越。复合益王菌制剂通常由乳酸菌,芽孢杆菌和酵母菌组成,不同类型的菌株,互补协作,达到最佳的应用效果。复合益生菌制剂因菌株来源多,在肠道内,产生更多的淀粉酶、纤维素酶等消化酶,它们可以与内源酶协同,共同参与营养物质的消化与吸收,饲料利用率(Bieleckaetal20()2)。例如:芽孢杆菌能产生蛋白酶,脂肪酶及过氧化物酶等多种营养因子,乳酸菌可以分泌乳酸,调节动物肠道pH值,间接调节菌群,而丁酸梭菌可以产生较多的丁酸,具有较强的杀菌作用。另有研究表明,35日龄仔猪饲喂乳酸杆菌和屎肠球菌复合制剂,其饲料利用率提高,益生菌组仔猪獎便中Enterobacteria的数量显著降低(Ross et al 2010)。复合菌制剂可以提高肝脏和血楽蛋白质的合成速率,以缓解因为结肠炎引起的营养消化不良(Harding etal 2008)。复合益生菌制剂对腹湾的防治效果更为显著。初生仔猪哺乳前灌服微生态制剂(主要成分为芽孢杆菌),对仔猪黄白_有防治作用,且显著提高仔猪的生长速率(金岭梅etal1999)。另有研究表明,饲粮中添加芽孢杆菌的多菌种混合剂治疗犬急性腹湾比使用单一菌株效果更为显著(Herstad et al 2010)。
…………


结论


(1)与阴性对照相比,日粮中添加适量单一或复合益生菌制剂,可以改善断奶仔猪的生长性能,并显著降低腹湾率,其中,复合制剂效果更佳。据作者所知,这种规模(实验猪>300头)的益生菌应用评价实验并不多见;
(2)适量的抗生素和B. subtilis KN-42和E. faecalis LAB31显著提高赛便中Z<acfo6ac!7/ws的相对含量。然而,通过Lacfoftacf/to类群特异性DGGE分析表明,类便中Lactobacillus的结构组成较稳定。测序表明,樊便中主要Lactobacillus 为 L. reuteri, L. fermentum, L. vaginalis, L. johnsonii, L. gasseri, L.acidophilus 和 L. mucosae。其中,以 1. renter 频率最高;
(3)总菌DGGE分析表明,抗生素及益生菌可以改变仔猪类便菌群,但是猪本身个体差异大,难以分析菌群变化规律。测序发现,断奶仔猪粪便中的细菌以梭菌占绝对优势。此外,部分结果显示,益生菌可能提高相对数量,尽作者所知,如果这一结果属实,这在猪中尚是首次发现。2004年,该菌首次从临床上分离,2008年PNAS指出是抗炎症细菌,近几年,与人类肠炎是研究热点;
(4)抗生素和益生菌减少堯便中挥发性脂肪酸,如乙酸及丙酸的含量。抗生素还可以减少丁酸的含量。而挥发性脂肪酸是评价猪场恶臭程度的关键指标。
…………
参考文献(略)


QQ 1429724474 电话 18964107217