本文是一篇药学论文，本文通过对两种栽培基质孢子粉的水分、灰分、浸出物、无机元素及多糖、三萜的含量等进行常规质量检查，初步探讨了不同栽培基质灵芝孢子粉的质量差异。
第一章灵芝孢子粉概述
1.1灵芝的栽培方式
灵芝的栽培方式大致可以分为段木栽培和代料栽培[6]。在我国，段木栽培灵芝主要产地分布在浙江、安徽、福建、吉林、四川等地，子实体品质较佳，易于控制，不易污染，干燥后子实体质地厚实、坚硬、营养及药效成分齐全[7]。然而，这种栽培方式需要大量木材，容易使自然资源遭到破坏，同时，段木栽培灵芝存在连作障碍的现象，限制了灵芝的栽培种植[8]。代料栽培灵芝常以木屑、棉籽壳、麦麸、玉米粉、蔗糖及石膏等作为灵芝栽培基质原料，按不同比例制作代料进行灵芝的栽培种植，这种方式节省了木料，但由于培养基质疏松，在菌丝生长阶段造成营养的大量消耗，同时子实体成熟、采收时间较短，因此，子实体干燥后质地疏松，药效成分低[7]。
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1.2灵芝孢子粉的采收加工
灵芝子实体采收时间一般从灵芝菌盖周围淡金黄色的生长圈逐渐消失，边缘变成淡红棕色，菌盖开始木质化，但尚未有孢子弹出时，进行采收[9]。孢子粉的采收方式主要包括：套袋采粉、风机吸附采粉和地膜覆盖采粉
灵芝孢子粉的加工主要经过：过筛除杂、灭菌、烘干、破壁、粉碎过筛以及包装和贮存等，在加工过程中应严格控制人员及厂房的安全卫生，以保证质量[10]。
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第二章灵芝的保肝作用研究现状
2.1对酒精性肝损伤（alcoholic liver disease，ALD）的保护与作用机制
在我国，酒精性肝病发病呈上升趋势，其中需要住院治疗的酒精性肝病患者也呈上升趋势，酒精性肝病的预防和治疗研究具有良好的市场，开展具有良好的保肝活性的天然产物的挖掘研究具有重要意义[23,24]。
灵芝中的多种成分多糖、三萜和灵芝孢子油等对酒精性肝损伤均有一定的保肝活性，其活性成分可抑制小鼠血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的异常升高，对酒精性肝脂过度堆积和肝脏病理改变有明显的保护作用；同时降低肝脏丙二醛(MDA)和乳酸脱氢酶(LDH)水平，提高谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和乙醇脱氢酶(ADH)水平，从而显著改善酒精诱导的肝脏氧化应激[25-27]。孙艳辉等[28]研究提示灵芝多糖可通过抑制肝脏组织NLRP3炎性小体表达和急性酒精性肝损伤小鼠炎性反应及肝脏脂肪沉积，有效缓解肝组织损伤，恢复其肝功能。
此外，除测定肝损伤过程中的一些血清标志物外，目前也有研究通过肠道微生物学、肝脏代谢组学和RT-qPCR等证实灵芝的保肝作用，GUO Weiling等[29]研究指示灵芝酸（GLE）可通过提高肠道部分菌群的相对丰度来改善肠道微生物紊乱以及参与初级胆汁酸生物合成、核黄素代谢、色氨酸代谢和不饱和脂肪酸生物合成等调节肝脏代谢；叶丽云等[30]研究指出灵芝子实体多糖能够调节小鼠肝脏中脂质与有机化合物的代谢有效减轻急性酒精造成的肝损伤，这些代谢通路主要有胆碱代谢、甘油磷脂代谢和ABC转运蛋白，在酒精性肝损伤中，灵芝子实体多糖对这三个代谢途径产生的物质的差异均有改善作用。
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2.2对化学类试剂致肝损伤的保护与作用机制
2.2.1四氯化碳(CCl4)致肝损伤
四氯化碳(CCl4)是研究化学品及其代谢产物对肝的毒害作用常选用亲肝类细胞毒性物质，其致病机制是CCl4可被细胞色素P450代谢形成高活性的三氯甲基(CC13·)，CCl3·可诱导脂质过氧化、炎症反应，影响DNA的合成和分裂，最终导致肝损伤[31]。
灵芝三萜及多糖均对CCl4所致的肝损伤有明显的保肝降酶作用，对脂质过氧化、炎症反应有较好的抑制作用。ZHENG等[32]研究发现灵芝多糖可以使CCl4中毒小鼠的SOD、GSH-Px和CAT活性显着升高，抑制CYP2E1的活性，同时可以增加IκBα和降低p-p65水平抑制NF-κB信号通路来缓解炎症。陈玉胜等[33]研究指出一定剂量的灵芝多糖在四氯化碳诱导的小鼠模型中可降低血清ALT和AST两种酶的活力以及TNF-α等促炎因子的形成及NOS活力，来抑制NLRP3炎性小体的活化，从而减轻炎症反应。
2.2.2α－萘基异硫氰酸酯(α－naphthylisothiocyanate，ANIT)致肝损伤
ANIT具有肝毒性，能导致啮齿动物的肝细胞及胆道细胞损伤，可模拟人体肝内胆汁淤积性疾病。胆汁淤积可引起肝内胆管狭窄、闭塞和胆汁酸分泌方式改变，且能增加肝胆疾病的发生风险，是肝病过程中常见的并发症[34,35]。
陈丛英等[36]研究表明灵芝多糖对该模型小鼠有明显的退黄、降酶（ALT、AST、ALP、γ-GT）和清除氧自由基的作用。张文晶等[37]研究显示灵芝三萜具有降低实验性胆汁淤积大鼠血清胆红素、转氨酶和改善肝脏组织损伤的作用，其作用机制为灵芝三萜能升高肝脏中的SOD活性、降低MDA含量，从而减少自由基产生和减轻肝组织过氧化损伤的作用，达到对ANIT所造成肝损伤的保护作用，使肝功能得到改善。
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第三章 灵芝孢子粉多糖的保肝作用评价 .................. 30
3.1 材料 .................................... 30
3.2 实验方法 ....................... 31
3.3 实验结果 .................................... 33
3.4 讨论 ............................. 35
3.5 小结 ........................... 36
结论 ....................... 37
第三章灵芝孢子粉多糖的保肝作用评价
3.1材料
3.1.1实验动物
60只雄性ICR小鼠（20~22 g），由辽宁省长生生物技术股份有限公司提供，实验动物许可证号：SCXK（辽）2020-0001。实验期间，小鼠的饲养温度维持在23±1℃，湿度55±10%，光照黑暗各12个小时的循环环境中。
3.1.2试剂主要实验试剂见表3-1。
药学论文参考
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结论
质量评价结果表明，两种栽培基质的灵芝孢子粉各项检查内容存在一定的差异。木段栽培灵芝孢子粉在水分、灰分、酸不溶灰分、浸出物、多糖含量上更高，代料灵芝孢子粉三萜含量更高。重金属元素的检测中，Cu元素有所差异，代料基质显著高于木段基质（p<0.05），Cr、Pb元素差异不显著其他重金属元素未检出，As、Hg、Cd均未检出，Cr、Pb元素差异不显著；其他无机元素，Ba、Sn元素含量差异显著（p<0.05），木段基质孢子粉的Ba元素含量显著高于代料基质孢子粉，Sn元素则显著低于代料基质孢子粉（p<0.05）；此外，代料基质孢子粉的Mg、Na元素极显著高于木段基质孢子粉（p<0.01），其他元素无明显差异。
对灵芝孢子粉多糖进行提取工艺优化探讨中，经脱脂处理后的孢子粉多糖的最佳提取工艺为液料比17.6：1、提取时间1.8 h、温度为85.9℃，提取率为1.85%。在单糖组成的研究中，甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、木糖和岩藻糖为构成两种基质孢子粉多糖的主要单糖，GLP木段的单糖平均含量分别为2.28、1.44、29.82、1.60和0.601（mg/100mg），物质的量比为1.00：0.69：13.07：0.84：0.29；GLP代料的平均含量分别为2.62、2.87、54.33、1.95、1.15(mg/100mg)，物质的量比为1.00：1.20：20.72：0.89：0.48。可见，二者葡萄糖的含量及比例最高。此外，GLP代料的各单糖含量均高于GLP木段，在单糖比例上也存在差异。
参考文献（略）